肽的重構(gòu)、??溶解度和儲存
更新時(shí)間：2023-12-22 點(diǎn)擊次數(shù)：1210
為了確保我們的材料保持其完整性，建議遵循以下存儲和使用指南。一般來說，我們不必將肽溶解在水性緩沖液中以進(jìn)行質(zhì)量控制。我們的建議基于經(jīng)驗(yàn)和肽序列。
最規(guī)則和帶電的肽
要確定溶解肽的合適方法，請僅使用少量合適的溶劑。將肽溶解在蒸餾水或去離子無菌水中（如果可能，無氧）。只有當(dāng)肽溶解后，才應(yīng)添加所需的緩沖鹽/溶液，并將溶液稀釋至最終濃度，即先溶解肽，然后添加緩沖液。
肽溶液中可能發(fā)生細(xì)菌降解。
始終使用無菌水溶解肽。
如果需要，可以通過 0.45 um 或 0.2 um 過濾器過濾肽溶液。不要將肽溶液保存在室溫下。
半胱氨酸、蛋氨酸或色氨酸等氨基酸容易氧化，應(yīng)溶解并儲存在無氧水中。這可以通過在減壓下通過保留惰性氣體如氮?dú)?、氦氣或氬氣進(jìn)行脫氣來制備。
如果肽不溶于純水，超聲處理可能有助于分解任何顆粒并提高溶解速度。
注意：超聲處理會導(dǎo)致溶液升溫和肽降解。
對于高堿性肽
如果肽含有許多堿性氨基酸（K、R 等），請使用乙酸水溶液（1 至 10%），并進(jìn)行或不進(jìn)行超聲處理。對于疏水性很強(qiáng)的肽，請使用 50% 乙酸水溶液。
對于高酸性肽
如果肽含有許多酸性氨基酸（E、D 等），請使用氨水溶液（1 至 10%）或揮發(fā)性堿性緩沖液（pH 高達(dá) 8），例如 N-乙基嗎啉乙酸鹽或碳酸氫鹽，并進(jìn)行或不進(jìn)行超聲處理。色譜分析前可能需要調(diào)整 pH 值。
丙醇或乙腈可用于溶解一些中等大小的肽。如果要將肽注射到柱上，有機(jī)溶劑尤其是丙醇的用量必須保持少量，否則保留時(shí)間將受到很大影響。
對于高疏水性肽
如果肽具有高度疏水性，具有芳香族或烴類側(cè)鏈，例如 Val、Leu、Ile、Met、Phe、Try、Ala，或者如果肽是中性，則使用離液劑，例如 DMF/D">
a。高濃度離液鹽可通過破壞二級結(jié)構(gòu)來幫助溶解肽。
b.離液劑適合制備用于分析的溶液，但可能會干擾用于肽研究的生物系統(tǒng)
C。滴加 DMF 或 DMSO（最多 30%）直至肽溶解。
d.在反相色譜中，DMF 將與緩沖液前沿一起洗脫。峰值可能會很高，具體取決于注射量。大多數(shù)肽的保留時(shí)間比大的 DMF 峰洗脫所需的幾分鐘要長。如果肽非常小并且洗脫較早，則注射肽時(shí)可能必須降低起始百分比。
凍干肽的儲存
所有肽均應(yīng)冷藏保存，最好在 -20 ℃ 下保存，以獲得最大穩(wěn)定性。大多數(shù)肽在 -20 ℃ 以下儲存時(shí)將保持穩(wěn)定數(shù)月。這適用于許多氨基酸衍生物、脂質(zhì)、酶和其他蛋白質(zhì)以及肽。例外是固定化蛋白質(zhì)和肽。
使用冷藏產(chǎn)品時(shí)，應(yīng)將瓶子或小瓶加熱至室溫。打開前放入裝有新鮮干燥劑的干燥器中。從 -20 ℃ 起，這可能需要一個(gè)小時(shí)或更長時(shí)間，具體取決于包裝尺寸。如果不這樣做，打開瓶子或小瓶時(shí)可能會導(dǎo)致產(chǎn)品上形成冷凝，并會大大降低材料的穩(wěn)定性。打開后，應(yīng)稱出所需數(shù)量以防止吸水。對于某些吸濕性肽來說，這是一個(gè)特殊的問題。
溶液中肽的儲存
溶液中的肽比凍干肽穩(wěn)定性差得多。為了獲得最佳結(jié)果，請遵循以下準(zhǔn)則。
1. 避免反復(fù)解凍和冷凍。建議將儲備溶液等分。只解凍需要的部分。請勿儲存稀釋溶液。
2. 為了獲得最大的穩(wěn)定性，請?jiān)?-20 ℃ 下儲存在無菌、pH 5 至 7 的緩沖溶液中。
3. 半胱氨酸、蛋氨酸或色氨酸等氨基酸容易氧化，應(yīng)溶解或保存在無氧水中。
4. 細(xì)菌污染會降解肽，因此請使用無菌水或緩沖液。
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